پایان نامه بررسی تاثیر تجویز خوراکی اسیدهای چرب امگا در بیان ژن آنزیم کاسپاز 8 در بیماران با سرطان معده
فهرست محتوا
چکیده
مقدمه و اهداف: از آنجایی که اسیدهای چرب امگا 3، 6، 9 در روند التهاب نقش دارند و التهاب از عوامل اصلی فعال سازی آپوپتوز میباشد، لذا استفاده از این اسیدهای چرب در کنار شیمی درمانی اگر منجر به فعال ساختن آپوپتوز شود، باعث ارتقای میزان اثر بخشی شیمی درمانی در بیماران مبتلا به سرطان معده میگردد. کاسپاز 8 از کاسپازهای اصلی در تأیید شروع فرایند آپوپتوز از مسیر خارجی به شمار میرودکه اندازه گیری میزان آنزیم فعال در سلول و میزان بیان ژن آن ارزیابی خوبی برای میزان آپوپتوز میباشد. بنابراین هدف از این مطالعه بررسی تأثیر اسیدهای چرب امگا 9،6،3 بر روی آنزیم کاسپاز 8 در سرطان معده میباشد.
مواد و روشها: این مطالعه یک کارآزمایی بالینی از نوع دوسوکور میباشد که گروه هدف این مطالعه بیماران با آدنوکارسینومای معده میباشند که برای اولین بار تشخیص داده شده بودند و تحت شیمی درمانی قرار گرفتند. تعداد 34 نفر از بیماران در 2 گروه 17 نفری انتخاب شده و از این بیماران 3 نمونه بیوپسی از تومور معده برداشته شد. در مرحله بعد شیمی درمانی این افراد زیر نظر پزشک متخصص انکولوژِی آغاز شد. در 2 گروه انتخابی در گروه اول شیمی درمانی بدون تجویز مکمل و گروه دوم شیمی درمانی بامکمل اسیدهای چرب امگا به میزان روزانه 3600 میلی گرم به مدت 3 کورس شروع شد. از این بیماران مجدداً نمونه بیوپسی برداشته شد. بر روی نمونههای بیوپسی میزان نیمه کمی پروتئین آنزیم کاسپاز-8 به روش برش انجمادی و ایمنوهیستوشیمی و میزان بیان ژن آن به روش RT-PCR و Real-Time PCR بررسی گردید.
نتایج: میزان پروتئین آنزیم کاسپاز-8 در بافت سرطانی معده بعداز سه کورس شیمی درمانی در دو گروه مورد مطالعه افزایش نشان میدهد ولی این افزایش در گروه دوم بسیار بیشتر بوده و از نظر آماری معنی دار نمیباشد (06/0=p). برای تأیید این افزایش در مرحله بعد، استخراج و کمی سازی ژن آنزیم کاسپاز-8 انجام شد. که نتایج بدست آمده تأیید کننده این افزایش میباشد.
بحث و نتیجه گیری: با توجه به نتایج این مطالعه و مطالعات مختلف انجام شده چنین بنظر میرسد که تأثیر تجویز خوراکی اسیدهای چرب امگا 3، 6 و 9 بهمراه داروهای معمول شیمی درمانی بکار برده شده نمیتواند میزان پروتئین فعال آنزیم کاسپاز-8 و نیز افزایش بیان ژن این آنزیم را افزایش دهد و به احتمال زیاد مسیر داخلی آپوپتوز را فعال نماید.
کلمات کلیدی: سرطان معده، مقاومت دارویی، اسیدهای چرب امگا، آپوپتوز، کاسپاز-8
فهرست مطالب
عنوان
- فصل اول: کلیــات و پیشینه تحقیق
- 1-1- بیان مساله. 2
- 1-2- فرضیات پژوهش… 9
- 1-3- اهداف تحقیق.. 9
- 1-4- متغیرها 10
- 1-5- فیزیولوژی معده 12
- 1-6- سرطان. 12
- 1-7- مراحل سرطانی شدن معده 13
- 1-8- انواع مختلف سرطان در معده 16
- 1-9- عوامل ایجاد کننده سرطان معده 16
- 1-10- تشخیص سرطان معده 17
- 1-10-1- آندوسکوپی قسمت فوقانی دستگاه گوارش… 17
- 1-10-2- عکس قسمت فوقانی دستگاه گوارش و معده و روده 18
- 1-10-3-اولتراسونوگرافی به روش آندوسکوپی.. 18
- 1-10-4- سی تی اسکن.. 18
- 1-10-5- ام اِر آی.. 19
- 1-11- درمان سرطان معده 20
- 1-11-1- جراحی.. 20
- 1-11-2- شیمی درمانی.. 20
- 1-11-2-1- نحوه استفاده از داروهای ضد سرطان. 21
- 1-11-2-2 مقاومت دارویی سرطان. 21
- 1-11-2-3- مکانیسم سلولی مقاومت به دارو. 22
- 1-11-2-4- عوارض جانبی شیمیدرمانی.. 23
- 1-11-3- رادیوتراپی.. 24
- 1-11-3-1- عوارض جانبی رادیوتراپی.. 24
- 1-12- آپوپتوز. 25
- 1-12-1- مسیر گیرنده مرگ…. 26
- 1-12-2- مسیر میتو کندریایی.. 27
- 1-13-کاسپازها 29
- 1-13-1- انواع پروتئینهای کاسپازی.. 30
- 1-14- اسیدهای چرب امگا 3، 6، 9. 30
- 1-14-1- نقشهای اسیدهای چرب در بدن. 30
- 1-14-2- تقسیم بندی چربیها 31
- 1-14-3- اسیدهای چرب ضروری.. 32
- 1-14-3-1- امگا- ۳. 33
- 1-14-3-2- امگا- 6. 35
- 1-14-3-3- امگا- 9. 36
- 1-15- پیشینه تحقیق.. 37
- فصل دوم: مواد و روشها
- 2-1- نوع مطالعه. 41
- 2-2- تعیین حجم نمونه. 41
- 2-3- انتخاب بیماران. 42
- 2-4- روش برش انجمادی و رنگ آمیزی ایمنوهیستوشیمی.. 43
- 2-5- استخراج RNA و انجام Real time PCR.. 44
- 2-5-1- مواد شیمیایی مورد استفاده در استخراج RNA و انجام Real time PCR.. 44
- 2-5-2 دستگاهها استفاده شده در استخراج RNA و انجام Real time PCR.. 44
- 2-5-4- نمونهها 46
- 2-5-5- محاسبات آماری بررسی میزان بیان نسبی ژن. 46
- 2-5-6- استخراج RNA.. 47
- 2-5-7- تهیه بافر TAE.. 51
- 2-5-7-1- تهیه ژل آگاروز 1 %. 52
- 2-5-7-2- انجام الکتروفورز. 53
- 2-5-8- سنتز cDNA.. 53
- 2-5-9- Real-time RT-PCR.. 54
- 2-5-9-1- نمودار منحنی ذوب… 58
- 2-5-9-2- رسم نمودار استاندارد برای Real-Time PCR.. 58
- 2-5-9-3- کارایی (Efficiency) 59
- 2-5-10- روش تجزیه و تحلیل دادهها (روشهای آماری) 61
- فصل سوم: نتایج
- 3-1- مقایسه اطلاعات دموگرافیک بیماران گروههای مورد مطالعه. 63
- 3-2- نتایج حاصله از برش انجمادی و رنگ آمیزی ایمنوهیستوشیمی.. 64
- 3-3- الکتروفورز نمونههای RNA استخراج شده 66
- 3-4- نتایج Real-time RT-PCR.. 67
- 3-4-1- مقایسه میزان بیان ژن آنزیم کاسپاز 8 در گروههای مورد مطالعه. 67
- فصل چهارم: بحث و نتیجه گیری
- 4-1- بحث… 70
- 4-2- نتیجه گیری.. 74
- 4-3- پیشنهادات… 74
- منابع و مآخذ. 75
فصل اول:
کلیــات و پیشینه تحقیق
1-1- بیان مساله
سرطان معده چهارمین سرطان شایع و دومین علت مرگ در جهان میباشد. بر اساس برآوردهای جهانی، سالانه 930000 مورد سرطان تشخیص داده میشود که 700000 مورد منجر به مرگ میشوند. مناطق با ریسک ابتلا به این بیماری در ایران، مناطق شمالی و شمالغرب کشور میباشند. آدنوکارسینوما شایعترین فرم سرطان معده میباشد و عفونت ناشی از هلیکوباکتر پیلوری، مصرف دخانیات، رژیم غذایی پر نمک و دریافت آنتی اکسیدان ناکافی ازعوامل ابتلا به این بیماری در ایران گزارش شدهاند (1). محل تومور در 75 درصد از بیماران مبتلا به کارسینوم معده، ثلث دیستال آن میباشد. در ناژلنفاتیک این تومورها، به سمت گرههای لنفاوی زیر پیلور، ناف کبدو امتداد هر دو انحنای بزرگ و کوچک معده میباشد. کارسینوم معده علاوه بر تهاجم به غدد لنفاوی، به ساختمانهای مجاور، یعنی به انتهای تحتانی مری توسط انتشار زیر مخاطی، پانکراس، کولون عرضی، پریتوئن وبندرت دئودنوم نیز گسترش مییابد. انتشار خونی تومور، منجر به متاستازهای ریوی، کبدی، مغزی و استخوانی میگردد.
کارسینوم معده از نوع آدنوکارسینوم بوده و از لحاظ پاتولوژیک معمولاً خود را به یکی از 4 شکل زیر نشان میدهد (2):
در دنیای غرب بسیاری از موارد سرطان معده زمانی تشخیص داده میشوند که بیماری در مراحل پیشرفته خود قرار دارد و عمل جراحی نقش بسیار محدودی درروند درمان ایفا میکند و شیمی درمانی سیستمیک تنها راه مؤثر در درمان بیماری میباشد. مقصود از شیمی درمانی، درمان بیماری از طریق بکار بردن داروهای گوناگون است ودر معنای خاص آن که امروزه بکار برده میشود غرض درمان دارویی تومورهای گوناگون (یا به اصطلاح سرطان) است. استفاده از داروهای ضد سرطان یا شیمی درمانی یکی از چند راه درمان این گونه تومورها است و میتوان آن را با روشهای دیگری مثل جراحی و پرتو درمانی توأم کرد.
شیمی درمانی در معالجه تومورها بسیار مؤثر بوده و امروزه با کشف داروهای جدید ضد تومور این تأثیر رو به افزایش است. طبق مطالعات انجام شده مشخص شده است که سرطان معده به شیمی درمانی تا حدودی حساس میباشد و باعث کاهش رشد تومور در 70-50 درصد بیماران میشود ولی مدت زمان کاهش در رشد تومور کوتاه بوده و افزایش طول عمر بیماران موفقیت چندانی نداشته است و در بسیاری از موارد مقاومت به شیمی درمانی مشاهده شده است. با توجه به اینکه مکانیزم مولکولی مقاومت دارویی سرطان معده به خوبی شناخته نشده است، لذا درک مکانیزم ایجاد تومور و غلبه بر اثرات سایتوتوکسیک شیمی درمانی وارتقای میزان اثر بخشی شیمی درمانی در بیماران مبتلا به سرطان معده با تغییر رژیم غذایی یک گام بسیار مهم جهت توسعه روشهای درمانی و غلبه بر مقاومت دارویی میباشد (2). اسیدهای چرب ضروری از جمله امگاها گروهی از اسیدهای چرب هستند که بدن قادر به ساختن آنها نیست و باید از طریق غذا تأمین شوند. رژیمهای نادرست با حذف و یا محدود کردن مصرف بعضی از انواع چربی باعث شدهاند که بدن ما با کمبود آنها مواجه شود. کمبودی که با محروم کردن بدن از نقش مهم آنها در کارهای مختلف حیاتی، ما را با بروز مشکلات مختلف روبهرو میکند.
اسیدهای چرب ضروری[1]، اسیدهای چرب اشباع نشده با زنجیره بلند هستندکه ازاسیدهای لینولنیک، لینولئیک و اولئیک مشتق میشوندکه چربیهای لازمی هستند که در بدن انسان ساخته نمیشوندو باید از طریق رژیم غذایی تأمین شوند. اسیدهای چرب ضروری به دو خانواده تقسیم شدهاند: امگا-3 و امگا-6. امگا-9 نیز لازم است اما “ضروری” نیست چون بدن قادر است مقدار اندکی از آن را به وسیله اسیدهای چرب ضروری موجود در رژیم غذایی درست کند. اسیدهای چرب امگا-3 از اسید لینولنیک، امگا-6 از اسید لینولئیک و امگا-9 از اسید اولئیک مشتق میشوند.
کمبود میزان اسیدهای چرب ضروری و ناهماهنگ بودن نسبت امگا-6 به امگا-3 باعث بروز ناراحتیهایی جدی مانند سکته قلبی، سرطان، مقاومت به انسولین، آسم، بیماری لوپوس، اسکیزوفرنی، افسردگی، افسردگیهای پس از بارداری، پیری زودرس، گرفتگی عروق، چاقی، دیابت، آرتروز و آلزایمر میشود.
اسیدهای چرب امگا 3، 6، 9 از قلب، رگها، اندام تناسلی، سیستم دفاعی و عصبی بدن محافظت میکنند.
بدن برای ساخت و ترمیم غشای سلولی و نیز سم زدایی و غذارسانی به آنها نیاز دارد. کار اصلی آنها تولید پروستاگلاندینها است که تنظیم کننده اعمالی مانند ضربان قلب، فشار خون، لخته شدن خون، باروری و لقاح بوده و نیزدر عملکرد صحیح سیستم ایمنی بهوسیله کنترل التهابها و مقابله با عفونتها نقش مهمی دارند. التهاب واسترسهای محیطی مانند رادیکال آزاد از جمله عوامل فعال کننده مرگ سلولی است
Abstract
Introduction and objects:
Materials and Methods:
Results:
Discussion:
Keywords: gastric cancer, medication resistance, omega fatty acids, Apoptose, Caspase-8
[1]. Essential Fatty Acids
نقد و بررسیها
هنوز بررسیای ثبت نشده است.